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导读 大家好,乐天来为大家解答以下的问题,关于tm值大小与什么因素有关,tm值这个很多人还不知道,现在让我们一起来看看吧!1、不同的引物当然退
大家好,乐天来为大家解答以下的问题,关于tm值大小与什么因素有关,tm值这个很多人还不知道,现在让我们一起来看看吧!
1、不同的引物当然退火温度也不相同,一般在设计引物的时候,程序就会显示出Tm值是多少。
2、在做PCR的时候,将退火温度设定的稍微低于Tm值一点,降低引物的特异性,可能会好点。
3、当然,做PCR有一定的运气成分,同样的条件有时能扩出基因来,有时候却不能。
4、一般来说,一直无法P出基因的话,首先就要检查引物设计是否有问题,如果没有问题,或者以前P出来过。
5、那么检查下退火温度,多试几个温度。
6、再就是Mg离子的浓度,模板不要太多。
7、多尝试一下。
8、总之,设定退火温度的时候略微比Tm低一点,适当的调整,多多尝试,就好了。
本文分享完毕,希望对大家有所帮助。
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